原创 点成案例 | 离心机的原理、分类、应用及其在新冠病毒分离中的使用

目前市面上离心机的种类繁多，在不同领域有不同适用的离心机。根据转速不同、是否制冷、设备大小等标准可以进行以下分类：

根据转速不同，可以分为：低速离心机、高速离心机、超高速离心机等

根据是否制冷，可以分为：冷冻离心机和普通离心机等

根据应用场景，可以分为：实验室离心机和工业离心机等

根据设备大小。又可以分为：迷你离心机、台式离心机、立式离心机等

常用于不相溶液体的分离、 蛋白质提纯、悬乳液沉淀分离、细胞提取、DNA/RNA提取、PCR板离心、生物成分沉淀等应用。

在如今新冠肺炎疫情成为了常态性现状的背景下，对于新冠病毒的研究是当前生物学、医学等科研人员研究的一大重点。2020年初，北京协和医院就发布了新冠病毒操作指南，在整个参考实验过程中，病毒样本的裂解过程是多次需要使用到离心机的。

病毒样品的裂解过程中，全程都建议在生物安全柜中使用离心机，这样可以有效防止样品泄漏和污染带来的麻烦，实验中用到的离心机转速要求需要达到8000rpm及以上，这属于高速离心机，且要可适配低容量EP管。

以下是官方提供的病毒样本裂解的参考过程：

1、用1.5ml的无菌离心管（EP管），移液器移取560μl 的AVL裂解液，并加入5.6μl Carrier RNA和140μl已灭活的待提取核酸的待测样本，涡旋振荡15s，室温静置10min；

2、将上述EP管放入离心机内瞬时离心以去除可能残留在EP管盖上的裂解产物，防止污染；

3、裂解完成后，向EP管中加入560μl无水乙醇，并振荡混匀15s；

4、再次将上述EP管放入离心机内瞬时离心以去除可能残留在EP管盖上的裂解产物，防止污染；

5、向离心柱加入裂解产物630μl，并用8000rpm转速离心1min；建议在生物安全柜中进行离心，防止样品泄漏和污染带来的危害；若离心机在生物安全柜之外，则每次使用前都需进行外表面消毒。

6、更换废液收集管，要从离心机中小心取出离心柱，将上层离心柱转移到新收集管中，继续将剩余裂解产物630μl加入离心柱中，若样本体积大于140μl时需重复此步骤，直到全部裂解产物都过柱离心，8000 RPM转速离心1min，之后小心地将离心柱转移到新的收集管中；

7、取500μl AW1加入离心柱中（注意，此处加样操作时务必将移液器吸头接触离心柱内壁缓慢加样），8000 rpm转速离心1min，小心取出离心柱，更换新的收集管；

8、取500μl AW2加入离心柱中，14000rpm转速离心3min，小心取出离心柱，更换新的离心柱上端收集管，置于离心机中使用最大转速离心1min，以确保将AW2中的残液完全离心干净；

9、取无菌1.5mlEP管收集核酸。将离心柱上端小心放入1.5mlEP管中，取40-60μl的洗脱液AVE加入到离心柱中（注意：洗脱液应尽量全部覆盖住离心柱膜），用EP管的管盖盖住离心柱，使用无菌剪刀剪去原离心柱管盖；

10、室温静置1min，将其放入离心机中8000rpm转速离心1min来回收核酸；

11、丢弃离心柱，此时EP管中就是我们想要提取的核酸了，之后做好标记与登记。