结核分枝杆菌,俗称结核杆菌、结核菌,它是 引起结核病的病原体 。1882年由德国细菌学家郭霍(Robert Koch,1843-1910)发现并证明为人类结核病的病原菌,该菌可侵犯全身各器官,其中引起的 肺部疾病——肺结核 最为多见,是严重影响人类生命健康的传染病之一,成为了全球尤其是发展中国家最为严重的全球性卫生问题。对于结核杆菌的研究,仍是全世界研究人员重点研究内容之一,研究人员往往需要较多的样本量基础,相关 培养基的批量制备和储存 就尤为重要了。 结核杆菌常用的培养基是 罗氏培养基 ,全称为罗-琴(Lowenstein-Jensen)培养基。 罗氏培养基的主要组成成分及参考量如下: 磷酸二氢钾2.4g;一水硫酸镁0.24g;拘掾酸镁0.6g;天门冬素3.6g;马铃薯淀粉30g;2%孔雀绿水溶液20ml;蒸馏水600ml;甘油12ml;新鲜鸡蛋液1000ml 罗氏培养基的制备方法及步骤: 在无菌区间内,将上述材料中的磷酸二氢钾、硫酸镁、拘掾酸镁、天门冬素和甘油溶解与蒸馏水中并加热 在加热的同时加入马铃薯淀粉并不断搅拌,在沸水中水热1小时,再置于56度水浴锅中水浴1小时; 用肥皂水清洗鸡蛋,之后用70%的酒精擦洗,晾干; 无菌条件下打破蛋壳,将蛋白蛋黄装入灭菌容器中,充分搅拌混匀,之后用无菌纱布进行过滤,得到新鲜鸡蛋液; 将鸡蛋液加入到一开始准备的混合液中,并加入灭菌的2%孔雀绿水溶液,均匀混合,避免气泡; 将混合好的溶液分装到灭菌的试管内并封闭,每支试管液量在6-8ml左右; 将试管放在架子上并保持一定斜度,然后放在蒸汽浓缩器(例如点成TBT-T100IN结核菌培养基制备仪)中,在85℃的水浴中静置50分钟来浓缩培养基; 之后取出并放置于4℃冰箱中低温保存备用; 使用时取出并恢复到室温,检查培养基是否污染即可,一般建议一个月内使用。 在制备罗氏培养基的过程中,需要用到一些必要的仪器,如用于 恒温控制 的 水浴锅 、用于 消杀病毒细菌 的 灭菌器 、还有专门用于 批量浓缩凝固培养基 的 蒸汽浓缩器 等,点成均可提供以上设备,还可以提供 无菌环境的超净工作台 ,满足实验需求。 点成SAP系列恒温水浴 点成NC150/150C卧式蒸汽灭菌柜 点成TBT-T100IN结核菌培养基制备仪 点成UVT-S-AR超净工作台