标签: 灭菌验证

1.过热水灭菌简介： 过热水灭菌借助高温高压过热水进行灭菌，是当前制药行业内非常成熟的一种热力灭菌方式。和纯蒸汽灭菌一样，过热水灭菌同属于热力灭菌范畴。两者在工作原理和灭菌作用也相同，都是利用湿热条件破坏微生物中重要成分和酶系统，能够使一切微生物致死。通常在121℃温度维持30min，分注水、加热、灭菌和冷却四个阶段进行。 不同的是，过热水灭菌利用的是高温高压过热水，而是纯蒸汽灭菌利用的是高温高压蒸汽。两者在应用上也有所差异，目前，过热水灭菌主要应用于注射用水的储存与循环系统中，而纯蒸汽灭菌在纯化水系统、注射用水系统以及配液系统得到广泛使用。 2.过热水灭菌的4个阶段： 注射用水储存与分配系统的过热水灭菌程序主要分为4个阶段： （1）注水阶段：在罐体内注入一定体积的注射用水，一般以30%~40%罐体液位为宜； （2）加热阶段：启动循环系统，利用双板管式换热器将储存与分配系统中的注射用水从80℃加热到121℃； （3）灭菌阶段：121℃温度下维持30min，并确保罐体温度、回水管网温度和呼吸器灭菌温度均需达到121℃才能开始计时； （4）冷却阶段：开启冷却水控制程序，循环注射用水按预定速度降温至设定温度。 3.与纯蒸汽灭菌相比，过热水灭菌有如下优点： （1）无需消耗纯蒸汽：采用工业蒸汽为热源，无需另外制备纯蒸汽。 （2）无需考虑冷凝水排放：灭菌过程中，无需考虑zui低点冷凝水的排放问题，高压过热水循环流经整个系统，不会发生冷凝水排放不及时引起的灭菌死角。 （3）易于控制的调制加热和冷却：采用注射用水系统已有的维持80℃高温循环用双板管式换热器进行系统升温，节省项目投资且操作非常方便。 （4）当系统用点较多或冷点采用全自动sub-loop设计时，过热水消毒优势更加明显； （5）过热水灭菌时，注射用水罐体内气相为高压饱和纯蒸汽，可有效实现注射用水储罐呼吸器的在线灭菌。 4.FOW过热水灭菌器适用于： 1、非肠道溶液的灭菌，密封容器中的液体不可变形（例如玻璃小瓶）和热敏密封容器（例如塑料袋）中的液体或瓶子） 2、 预充式注射器(PFS)的终端灭菌 5.选择正确的设备Tracksense Pro--无线验证系统进行验证和鉴定 对于无线数据记录器，Ellab提供TrackSense® Pro系列，这是为各种应用和过程设计的各种不同的数据记录器。无线数据记录器非常适合涉及密封区域或需要额外测量参数的情况。 具有可互换传感器的TrackSense Pro第三代数据记录仪是一种耐用，智能，准确且高度灵活的系统，用于测量温度，压力，湿度，电导率，CO2，真空和蒸汽渗透率。通过将适当的记录仪与选定的可互换传感器结合使用，最终为用户配置了TrackSense Pro无线数据记录仪解决方案。 配备可互换传感器系统的记录仪，使任何人都可以轻松地在测量参数和多种不同的传感器选件之间进行切换，这些传感器有各种材料，形状和尺寸。只需拧开传感器头并将另一个传感器应用于数据记录仪的上部即可。作为一项附加功能，可以在传感器和记录仪之间放置一个SKY模块形式的实时数据通信选件，从而可以将实时数据直接传输到PC。这些功能使TrackSense Pro数据记录仪与大多数应用程序兼容，因此成为了zui通用的选择。 可互换性是独特电子设计的一部分。每个传感器都包含一个包含软件识别的传感器ID号和校准常数的E-books。该设计还包括一个A/D转换器，可在采集过程中将模拟数据转换为数字数据，然后保存在数据记录器内存中，然后最终上传到ValSuite。该数据链接到传感器，可以轻松地与任何TrackSense Pro数据记录器交换而不会丢失数据。另一个优点是只需返回传感器进行工厂重新校准。Ellab还提供SKY选项，允许用户为记录仪配备实时数据通信模块，以便在验证软件中查看实时数据 关于虹科和Ellab（意莱伯） 自1949年以来，Ellab一直提供行业领xian的精度和品质的热验证解决方案。虹科Ellab的硬件和软件由丹麦的总部设计、制造和分销，虹科与Ellab（易莱博）合作提供验证系统，校准系统，验证和确认以及租赁服务和校准服务，服务于大型、中型、小型的制药、医疗和食品行业的客户。我们在灭菌，冷冻干燥，隧道式烘箱，巴氏杀菌等多种应用提供解决方案。

湿热灭菌常见术语 （一） D 值 1.D 值：微生物的耐受参数，指在特定温度下使微生物的数量下降一个对数单位或杀灭 90% 所需要的时间。 D 值越大，说明该微生物的耐热性越强。 D 值需注明参照温度，即以 DT 表示，如 D121℃=1.5 分钟，指在 121℃ 条件下，杀灭 90% 的微生物需要 1.5 分钟。 注：自然界存在的微生物 D121℃ 一般小于 0.5 D 值测定方法 ∶1. 阴性分数法 2. 存活曲线法 2. 微生物 D 值举例 ∶ l 嗜热脂肪芽孢杆菌：已知最具热抵抗力的微生物， D121℃ 值在 1.5 分钟到 3 分钟之间 l 葡萄球菌：通常是引起洁净室污染的“祸首"， D121℃ 值大约为 0.25 分钟 l 生孢梭菌：典型的高抵抗性的“正常菌群， D121℃ 值大约为 0.8 分钟 l 假单胞菌：通常存在水中， D121℃ 值大约为 0.17 分钟 3. 嗜热脂肪芽孢杆菌在不同温度，不同介质中的 D 值： l 同一种微生物在同种溶液中，不同温度下 D 值不同 ; l 同一种微生物在同一温度下，不同溶液中 D 值不同。 （二） Z 值 使微生物的 D 值变化一个对数单位所需升高或下降的温度。常用于累计一个灭菌程序在加热和冷却阶段随温度变化的杀灭时间。 （三） 灭菌率（ Lethal Rate , L ） 灭菌率：指某一温度 T(℃) 下灭菌 1 分钟所获取的标准灭菌时间，用 L 表示。 L （ Tref ， z ） =10 （ T-Tref ） /z ； Tref 指标准灭菌温度 F0 ：指 Z 取 10℃ 时，一个湿热灭菌程序赋予被灭菌品 121℃ 下灭菌的等效灭菌时间。 （四）无菌保证水平（无菌保证水平 Sterility Assurance Level, SAL ） 产品 / 物品经灭菌后微生物残存的概率。描述灭菌后非无菌单元概率。无菌保证水平 ≤10-6 ，即灭菌后微生物存活的概率不大于百万分之一。 （五）平衡时间 平衡时间指灭菌腔室（腔室参照温度通常是排水口探头温度）达到最小设定灭菌温度和装载达到最小设定灭菌温度之间的时间间隔，后者由加热最慢的热穿透探头测得。它体现了灭菌柜去除装载中空气并对装载加热的能力。 （六）生物指示剂 (Biological Indication,Bl ) 1 、生物指示剂：对特定灭菌处理有确定的抗力，并装在内层包装中、可供使用的染菌载体。 2 、蒸汽灭菌常用 BI 菌种 - 嗜热脂肪芽孢杆菌，两个重要质量参数：孢子含量和 D 值 （七）灭菌（ Sterilization ） 指用以使一个产品达到规定微生物存活概率的工艺过程。 （八）灭菌程序 ( Sterilization Cycle ) 指使物体成为无菌的一系列运行参数（例如时间、温度、压力 ) 和条件组成的程序。 （九）灭菌原理 1 、灭菌原理： 121℃ 时，水发生相变，产生大量的热。饱和蒸汽在接触到灭菌物体时，发生相变，由饱和蒸汽变成水，产生大量的热，热量将微生物杀死 2 、水在不同温度下的饱和蒸汽压： 121℃ 对应两个大气压， 134/135℃ 对应三个大气压 3 、湿热灭菌的相关法规： EN285 英国、 GB8599 中国、 HTM 美国 —— 蒸汽灭菌柜的要求 （十）灭菌的基本要求 1 、无菌药品应当尽可能采用加热方式进行最终灭菌 2 、 SAL 无菌保证值不得高于 10-6 3 、装载方式通过验证确认 4 、灭菌工艺再验证周期：最长一年 （十一）灭菌合格标准 1 、物理指标：温度时间曲线； F0 值 2 、生物指标（生物指示剂 ) ：降低 6 个 log 值，阳性对照实验 最为常用进行判断的灭菌标准为 F0 值 虹科 Ellab 灭菌验证方法 自 1949 年以来，虹科 Ellab 一直是您的验证合作伙伴，提供医药和生物技术行业优秀的精度和质量的热验证解决方案，包括有线温度系统 E-Val Pro 和无线温度验证系统 TrackSense Pro ，硬件和软件均在丹麦的总部设计和制造。虹科 Ellab 提供验证设备和 IQ/OQ 服务，以及租赁服务和校准服务，我们以专业的客户支持计划，包括技术支持，现场和工厂校准，服务能力等赢得客户的信赖。 ELLAB 服务于大型、中型、小型的制药、医疗和食品行业的企业，并涵盖几乎所有的过程中验证解决方案，包括在灭菌，冷冻干燥，隧道式烘箱，巴氏杀菌，仓库温度分布验证，巴氏灭菌等多种应用。 虹科 ValSuite Pro 验证软件自带灭菌值计算（默认 F0 ） ValSuite Pro 是 ELLAB 著名的验证和校准软件，符合 FDA 21 CFR Part 11 的要求，并确保了数据的完整性，具有审计追踪和权级分配的功能。 ValSuite 的功能包括具有明确通过 / 失败标准的自定义报告、 测试模板、数据分析、监控、实时数据等。 ValSuite 支持多种语言版本，包括中文，可以在 Windows 7 、 8 和 10 32/64 位系统下运行。其强大的数据分析工具，减少了定位关键数据的时间，提供验证的工作效率。 虹科 ELLAB 的温度验证软件 ValSuite 自带灭菌值计算功能，默认自动计算 F0 。以下是计算公式： Δ t—— 测量被灭菌物料温度的时间间隔，通常为 0.5~1min T 是每个时间间隔所测得的灭菌物料的温度 Tb 参比温度（通常为 121℃ ） Ps ： 1. 在 ValSuite™ 软件中，致命性提升的限制是 50.000 。 2.D 值 — 灭菌值计算的减少因子默认为 1 。如果 D 值为 2 ，灭菌值计算将除以 2 ，依此类推 3.F0 （湿热灭菌）一般灭菌方法，例如高压釜 （（灭菌值公式）按分钟计算） 默认值： l 参考温度： 121.11℃ 。 l 最小致死温度： 91.11℃ 。 l Z 值： 10.00 。 2. 操作步骤： （ 1 ）添加灭菌值 （ 2 ）灭菌值计算

背景 由于微生物破坏率的效率降低，使用干热进行灭菌比蒸汽少见。然而，对于一些对水分敏感的材料，干热是一种合适的替代方法。除灭菌外，干热还可用于破坏热 原 ，然而，这意味着所需温度要高得多。这一工艺称为去热 原 。干热灭菌器可以设计为烘箱或热隧道。在这两种情况下，经过过滤的的热空气都会循环或垂直吹到正在灭菌的物品上。干热烘箱的尺寸各不相同，但体积很容易超过几立方米。对于热隧道，热段通常要大得多（几米长），传送带以规定的速度将物品移动通过加热和冷却区域，使其成为连续工艺。 温度和暴露时间是关键参数。一般来说，干热循环通常将在 160-190 ℃ 下进行，相应的暴露时间为 30-120分钟 。对于去热 原 循环，在烘箱中操作时，最低温度为 200°C ，持续至少一小时。由于去热 原 隧道在更高温度（通常为 325 ℃ 甚至 400 ℃ ）下运行，因此保持时间通常仅为几分钟。 定期校准，以确保数据尽可能准确 为了确保传感器提供尽可能准确的数据，需要在使用前和验证后对温度传感器进行校准。对于干热灭菌器，传感器的精度必须为 ±0.5 ℃ ，而对于除热 原 烘箱和隧道，精度为 ±1 ℃ 被认为是合适的。一些系统也使用真空，因此需要压力测量。 挑战 所有干热灭菌器都经过确认，以验证规范是否符合监管要求。这包括温度和保持时间性能。由于过程中的温度相对较高，因此必须意识到温度对测量系统的影响。表面材料甚至嵌入的电子元件都需要耐热。 然而，隧道中的移动部件和距离可能证明对基于线缆的系统是一个挑战。 除了在设定的时间段内保持最低和最高温度外，还有其他几个关键因素。其中包括灭菌期间整个传送带的温度分布以及灭菌期间各个温度传感器的偏差。 传感器的连续校准 验证热隧道和烘箱工艺时的另一个挑战是测量传感器的连续校准。用户必须记录传感器在使用时处于可接受准确度范围内。这意味着在验证运行前不久进行校准（预校准），然后在验证运行之后检查准确性，以确保它们仍然在预定义的公差范围内(后校准)。如果校准后检查显示精度超出要求的限值，则验证研究无效。 虹科 Ellab 提供对应的解决方案 如前所述，使用的温度在很大程度上取决于目标是干热灭菌还是去热 原 ，但在这两种情况下，温度水平都相对较高。 虹科 Ellab 提供两种不同的解决方案，有线和无线系统；是否选择 HK- EVal™Pro 热电偶系统或 HK- TrackSense®Pro 无线数据记录器取决于确切的条件。过去， HK- E-Val Pro 等有线热电偶系统用于干热灭菌和去热 原 ，提供了验证灭菌器所需的准确性和大量通道。然而，当通过门密封条或沿着隧道传送带引入线缆时，使用多条线缆可能会出现问题。此外，线缆的类型是至关重要的，因为它们必须柔韧灵活且能够承受高温，这就是为什么只有矿物绝缘线缆或 Kapton线缆 是合适的。 当专门讨论去热 原 隧道时，加上隧道中存在移动部件的事实，对基于线缆的系统还有一个额外的挑战。因此，我们建议使用 HK- TrackSense 无线数据记录器，因为它们比有线系统具有相当大的优势。 数据记录器优势 • 记录器易于放置在应用环境中，从而大大缩短了设置时间 • 由于记录器直接放置在应用环境中，它们跟随传送带运动 • 通过在记录器 / 电池周围使用热障，为记录器提供了足够的保护，使其能够在高达 400 ℃ 的温度下使用。关键是要注意加热期的持续时间以及隧道中的最高温度，以确保屏障为记录器提供足够的保护。如果记录器暴露在过高的温度下，可能会对设备造成无法修复的损坏。 虹科 Ellab 校准设备和软件 虹科 Ellab 提供的两种验证解决方案在测量技术方面略有不同。与 HK- EVal Pro 热电偶传感器相比， HK- TrackSense 无线记录仪系统通过使用基于 Pt-1000 的无线传感器提供了更高的稳定性和准确性。 由于随时间的漂移较低，因此这种额外的准确度和长期稳定性意味着校准频率较低。如前所述，对于校准干热灭菌，精度要求为 ±0.5 ℃，对于去热 原 ，精度为 ±1 ℃是可接受的。这可以通过使用各种干井校准器形状的 虹科 Ellab 校准设备轻松验证， HK- ValSuite™ 软件直接操作，将偏移值存储在数据库中。 为了可追溯性，所有无线记录器 / 传感器和热电偶都有一个唯一的序列号，嵌入固件并刻在身上。这确保了用于处理 HK- E-Val Pro 和 HK- TrackSense Pro 的 HK- ValSuite 软件可以执行验证研究所需的统计分析和 Fh 计算。然后，这些结果可以打印或以 PDF 报告的形式呈现，在满足必要要求时提供了极大的灵活性。 选择 虹科 Ellab 来验证 干热灭菌器和验证去热 原 工艺的好处 ✓ 在同一软件中运行的无线数据记录器或有线热电偶系统之间进行选择 ✓ 整个温度范围的高测量精度 ✓ 符合 FDA 21 CFR part 11 ✓ 完整文件的报告，包括 Fh 计算 ✓ 嵌入软件的校准设备 关于虹科和ELLAB （易来博） 自1949年以来，虹科Ellab一直是您的验证合作伙伴，提供医药和生物技术行业领先的精度和质量的热验证解决方案，包括有线温度系统 HK- E-Val Pro和无线温度验证系统 HK- TrackSense Pro，硬件和软件均在丹麦的总部设计和制造。虹科Ellab提供验证设备和IQ/OQ服务，以及租赁服务和校准服务，我们以专业的客户支持计划，包括技术支持，现场和工厂校准，服务能力等赢得客户的信赖。ELLAB服务于大型、中型、小型的制药、医疗和食品行业的企业，并涵盖几乎所有的过程中验证解决方案，包括在灭菌，冷冻干燥，隧道式烘箱，巴氏杀菌，仓库温度分布验证，巴氏灭菌等多种应用。