光是一种电磁波。自然是由不同波长(400~700nm)的电磁波按一定比例组成的混合光,通过棱镜可分解成红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等各种颜色相连续的可见光谱。如把两种光以适当比例混合而产生白光感觉时,则这两种光的颜色互为补色。处于同一直线关系的两种色光(如绿与紫、黄与蓝)互为补色。(www.ednchina.com/blog/cllzs原创)<?xml:namespace prefix = o ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:office" />
当白光通过溶液时,如果溶液对各种波长的光都不吸收,溶液就没有颜色。如果溶液吸收了其中一部分波长的光,则溶液就呈现透过溶液后剩余部分光的颜色。例如,我们看到KMnO4溶液在白光下呈紫红色,就是因为白光透过溶液时,绿色光大部分被吸收,而其它各色都能透过。在透过的光中除紫红色外都能两两互补成白色,所以KMnO4溶液呈现紫红色。
同理,CuSO4溶液能吸收黄色光,所以溶液呈蓝色。由此可见,有色溶液的颜色是被吸收光颜色的补色。吸收越多,则补色的颜色越深。比较溶液颜色的深度,实质上就是比较溶液对它所吸收光的吸收程度。下表列出了溶液的颜色与吸收光颜色的关系。
溶液的颜色与吸收光颜色的关系
当一束平行单色光(只有一种波长的光)照射有色溶液时,光的一部分被吸收,另一部分透过溶液
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光吸收示意图
设入射光的强度为I0,溶液的浓度为c,液层的厚度为b,透射光强度为I,则
式中lgI0/I 表示光线透过溶液时被吸收的程度,一般称为吸光度(A)或消光度(E)。因此,上式又可写为:
A = Kcb
上式为朗伯-比尔定律的数学表示式。它表示一束单色光通过溶液时,溶液的吸光度与溶液的浓度和液层厚度的乘积成正比。
式中,K为吸光系数,当溶液浓度c和液层厚度b的数值均为1时,A=K,即吸光系数在数值上等 于c和b均为1时溶液的吸光度。对于同一物质和一定波长的入射光而言,它是一个常数。比色法中常把lgI0/I 称为透光度,用T表示,透光度和吸光度的关系如下:
当c以mol·L-1为单位时,吸光系数称为摩尔吸光系数,用ε表示,其单位是L· mol-1·cm-1。当c以质量体积浓度(g·ml-1)表示时,吸光系数称为百分吸光系数,用E1%1cm表示,单位是ml·g-1·cm-1。吸光系数越大,表示溶液对入射光越容易吸收,当c有微小变化时就可使A有较大的改变,故测定的灵敏度较高。一般ε值在103以上即可进行比色分析。
强度为I0的光通过一种含有N种组成的物质后的光强为I。
其中,
I0—— 初始光强;
I —— 被削弱后的光强;
di—— 第i种物质的厚度;
Ei——第i种物质的吸光系数;
ci—— 第i种物质的浓度;
如果只关心其中的两种物质(氧基血红蛋白和还原血红蛋白)上式变为
ε1λ是还原血红蛋白对波长为 λ 的光的吸光系数。
ε2λ是氧基血红蛋白对波长为 λ 的光的吸光系数。
εj是其它物质对波长为 λ 的光的吸光系数。
根据血样饱和的概念结合上述公式,可以推导出血氧饱和度SAT的计算公式:
经过两种不同波长光线的测量,所有的ε都是常量,I0可测得,血氧饱和度SAT 即可求得。
实际的血氧计采用了一种叫做“脉搏法”的测量技术,这种技术的理论基础也是比尔伯朗定理。这种测量方法需要用光电探测器测量红光(660nm)和红外光(904nm)波长光强度变化,计算其中的脉动量与直流量后,查表可以计算出血氧饱和度值。(www.ednchina.com/blog/cllzs原创连载)
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