标签: 核酸提取

一、 应用场景 实验室离心机是一种通过绕固定轴 对物体进行旋转 ，使其受到离心力作用而 加速物质沉降速度 并实现 不同分子颗粒分离 的实验设备。 离心机广泛应用于化工、食品、制药、环保、教学、医疗等科学研究和生产部门，在物质分离和提取方面起到十分重要的作用，已成为现代科学研究重要仪器设备之一，更是生物学、生物化学、医学、生物工程、生物制药等行业科研与生产的必备设备。 二、 原理 离心是利用离心力将颗粒/不同沉降系数的物质从溶液中分离出来的一种技术。 离心机就是应用了离心原理，根据颗粒的大小、形状、密度、溶液粘度等差异，通过离心机上转子的高速旋转产生强大的离心力，加快混合液中不同比重成分的沉降速度，把样品中不同沉降系数和浮力密度的物质分离或分层分级，离心过程中密度较大的粒子会被更快地抛到离心管外侧，而较轻的颗粒则会移向中心，这样可以分离出悬浮液中的固体颗粒或者不同密度的液体成分。 （图片来源于网络） 三、 分类 目前市面上离心机的种类繁多，在不同领域有不同适用的离心机。根据转速不同、是否制冷、设备大小等标准可以进行以下分类： 根据转速不同，可以分为：低速离心机、高速离心机、超高速离心机等 根据是否制冷，可以分为：冷冻离心机和普通离心机等 根据应用场景，可以分为：实验室离心机和工业离心机等 根据设备大小。又可以分为：迷你离心机、台式离心机、立式离心机等 四、 实验室离心机常见应用 常用于不相溶液体的分离、 蛋白质提纯、悬乳液沉淀分离、细胞提取、DNA/RNA提取、PCR板离心、生物成分沉淀等应用。 （图片来源于网络） 五、 离心机在新冠病毒研究中的应用 在如今新冠肺炎疫情成为了常态性现状的背景下，对于新冠病毒的研究是当前生物学、医学等科研人员研究的一大重点。2020年初，北京协和医院就发布了新冠病毒操作指南，在整个参考实验过程中，病毒样本的裂解过程是多次需要使用到离心机的。 病毒样品的裂解过程中，全程都建议在生物安全柜中使用离心机，这样可以有效防止样品泄漏和污染带来的麻烦，实验中用到的 离心机转速要求需要达到8000rpm及以上 ，这属于高速离心机， 且要可适配低容量EP管 。 以下是官方提供的病毒样本裂解的参考过程： 1、用1.5ml的无菌离心管（EP管），移液器移取560μl 的AVL裂解液，并加入5.6μl Carrier RNA和140μl已灭活的待提取核酸的待测样本，涡旋振荡15s，室温静置10min； 2、将上述EP管放入离心机内瞬时离心以去除可能残留在EP管盖上的裂解产物，防止污染； 3、裂解完成后，向EP管中加入560μl无水乙醇，并振荡混匀15s； 4、再次将上述EP管放入离心机内瞬时离心以去除可能残留在EP管盖上的裂解产物，防止污染； 5、向离心柱加入裂解产物630μl，并用8000rpm转速离心1min；建议在生物安全柜中进行离心，防止样品泄漏和污染带来的危害；若离心机在生物安全柜之外，则每次使用前都需进行外表面消毒。 6、更换废液收集管，要从离心机中小心取出离心柱，将上层离心柱转移到新收集管中，继续将剩余裂解产物630μl加入离心柱中，若样本体积大于140μl时需重复此步骤，直到全部裂解产物都过柱离心，8000 RPM转速离心1min，之后小心地将离心柱转移到新的收集管中； 7、取500μl AW1加入离心柱中（注意，此处加样操作时务必将移液器吸头接触离心柱内壁缓慢加样），8000 rpm转速离心1min，小心取出离心柱，更换新的收集管； 8、取500μl AW2加入离心柱中，14000rpm转速离心3min，小心取出离心柱，更换新的离心柱上端收集管，置于离心机中使用最大转速离心1min，以确保将AW2中的残液完全离心干净； 9、取无菌1.5mlEP管收集核酸。将离心柱上端小心放入1.5mlEP管中，取40-60μl的洗脱液AVE加入到离心柱中（注意：洗脱液应尽量全部覆盖住离心柱膜），用EP管的管盖盖住离心柱，使用无菌剪刀剪去原离心柱管盖； 10、室温静置1min，将其放入离心机中8000rpm转速离心1min来回收核酸； 11、丢弃离心柱，此时EP管中就是我们想要提取的核酸了，之后做好标记与登记。

核酸自动提取仪又名核酸自动纯化仪，是应用配套的核酸提取试剂，来自动完成样本核酸提取工作的仪器。广泛应用在疾病控制中心、临床疾病诊断、输血安全、法医学鉴定、环境微生物检测、食品安全检测、畜牧业和分子生物学研究等多种领域。 分类 01 根据仪器型号大小不同划分 自动液体工作站： 自动液体工作站是功能非常强大的设备，液体分液、吸液等自动完成，甚至能通过整合扩增、检测等功能，实现标本提取、扩增、检测全自动化。大型自动液体工作站因为设备成本高昂，运行成本高，适合一次提取几千个同一种类标本，所以真正得到应用的比较少。 小型自动核酸提取仪： 利用封装好的配套试剂自动完成提取纯化过程；小型自动化的仪器，因为仪器设备和运行成本低，操作方便得到越来越多的应用。 02 根据提取原理不同划分 离心柱法的仪器： 离心柱法核酸提取仪主要采用离心机和自动移液装置相结合的方法，通量一般在1-12个样本，操作时间和手工提取相差无几，不能提高实际工作效率，且价格昂贵，不同型号仪器的耗材也不能通用。 磁珠法的仪器： 以磁珠为载体，利用磁珠在高盐低PH值下吸附核酸，在低盐高PH值下与核酸分离的原理，再通过移动磁珠或转移液体来实现核酸的整个提取纯化过程。由于其原理的独特性，所以可设计成很多种通量，既可以单管提取，也可以提取8-96个样本，且其操作简单快捷，提取96个样本仅需30-45min，大大提高了实验效率，且成本低廉，是目前市场上的主流仪器 核酸提取需求 1、仪器的安装环境，正常的大气压(海拔高度应该低于3000m)、温度+20℃-35℃、典型使用温度25℃、相对湿度10%-80%、畅通流入的空气为35℃或以下； 2、避免将仪器放置在靠近热源的地方，如电暖炉；同时为防止电子元件的短路，应避免水或者其他液体溅入其中； 3、进风口和排风口均位于仪器背面，同时避免灰尘或纤维在进风口聚集，保持风道的畅通； 4、核酸提取仪离其它竖直面至少10cm； 5、仪器接地，为了避免触电事故，仪器的输入电源线必须接地； 6、 远离带电电路，操作人员不得擅自拆解仪器，更换元件或进行机内调节必须有持证的专业维修人员完成，不要在接通电源的情况下更换元件。 FETMX6ULL-S核心板方案推荐 在新冠病毒肺炎疫情中，核酸检测功不可没，飞凌嵌入式为核酸提取仪提供Cortex-A7平台显控方案FETMX6ULL-S工业级核心板。产品采用NXP Cortex-A7 800MHz主频处理器，通过严格的EMC和高低温测试，确保核心板在严酷的环境下保证硬件与系统的稳定性。 推荐原因 FETMX6ULL-S 核心板基于NXP 公司ARM Cortex-A7 架构i.MX6ULL低功耗处理器设计，运行主频800MHz，核心板采用邮票孔设计，独特的电源管理架构使核心板功耗更低。 核心板功能接口资源丰富，最大支持8路UART ，同时还支持2路以太网、2路CAN 。 丰富的外围模块，支持WiFi、蓝牙、4G等模块。 24位并行LCD显示，高分辨率大屏显示操作流程，界面清晰，最高分辨率可达1366*768。 核心板尺寸仅44*35mm，8层沉金工艺PCB，工业级元器件选择，运行温宽-40℃~+85℃，确保产品在苛刻环境下稳定运行。